Lai novērstu savstarpēju piesārņojumu ekspluatācijas laikā, galvenās prasības attiecībā uz tā projektēšanu, būvniecību un ekspluatāciju ir šādas:
1. Laboratorijas projektēšana un uzbūve, droša darba sistēma vai drošības standarta darba procedūras atbilst pašreizējās "Vispārējās prasības laboratorijas bioloģiskam drošumam" GB19489 prasībām.
2. PcR ir sadalīts četrās funkcionālajās zonās saskaņā ar darba posmiem, proti, reaģentu uzglabāšanas un sagatavošanas zonai, paraugu sagatavošanas zonai, pastiprināšanas zonai un amplifikācijas produktu analīzes zonai. Ja ir aprīkots reāllaika fluorescējošo PCR instruments, var kombinēt amplifikācijas un produktu analīzes zonas. Katrai funkcionālajai zonai jābūt skaidri marķētai, un iekārtas un izstrādājumi dažādās funkcionālajās zonās nedrīkst būt jaukti.
PcR laboratorijas gaisa plūsmas virzienu var veikt saskaņā ar reaģenta uzglabāšanas un sagatavošanas zonu→paraugu sagatavošanas zona→pastiprināšanas zona→pastiprināta produkta analīzes zona, lai novērstu pastiprinātu produktu iekļūšanu iepriekš pastiprinātajā zonā kopā ar gaisa plūsmu. To var veikt kā samazināt gaisa spiedienu no reaģenta uzglabāšanas un sagatavošanas zonas → paraugu sagatavošanas laukums → pastiprināšanas laukums → pastiprināšanas produkta analīzes laukums. To var panākt, uzstādot izplūdes ventilatori, negatīva spiediena izplūdes ierīces vai citas iespējamas metodes.
3. Ieejot katrā darba zonā, stingri jāievēro viens virziens, tas ir, reaģenta uzglabāšanas un sagatavošanas zona → paraugu sagatavošanas zona → pastiprināšanas zona → pastiprināšanas produktu analīzes zona. Jāizmanto dažādas darba zonas (piemēram, dažādas krāsas). Darba ņēmēji, izvedot darba drēbes, kad viņi atstāj katru darba zonu.
4. Laboratorijas tīrīšana jāveic reaģenta uzglabāšanas un sagatavošanas zonas virzienā→paraugu sagatavošanas zona→pastiprināšanas laukums→pastiprināta produkta analīzes zona. Dažādām eksperimentālajām zonām jābūt savām tīrīšanas ierīcēm, lai novērstu savstarpēju piesārņojumu.
5. Kad darbs ir beidzies, darba zona nekavējoties jātīra. Laboratorijas stenda virsmai darba zonā jāspēj izturēt tādu ķīmisko vielu kā nātrija hipohlorīts dezinfekciju un tīrīšanas ietekmi. Ultravioletā apstarošana uz virsmas laboratorijas stenda jābūt ērti un efektīvi. Tā kā ultravioletās apstarošanas attālums un enerģija ir ļoti kritiska atsārņošanas efektam, var izmantot pārvietojamu ultravioleto lampu (254nm viļņu garumu), un pēc darba pabeigšanas to var pielāgot, lai apstarotu 60-90 cm robežās uz eksperimentālā galda. Tā kā pastiprināts produkts ir tikai daži simti vai desmitiem bāzes pāru (bp), tas nav jutīgs pret UV bojājumiem, tāpēc UV apstarots fragments jāapstaro uz ilgāku laiku, vēlams uz nakti.
Reaģenta uzglabāšanas un sagatavošanas zonas funkcijas ir: glabāšanas reaģentu sagatavošana, reaģentu izsniegšana un pastiprināšanas reakcijas maisījuma sagatavošana, kā arī palīgmateriālu, piemēram, centrifūgas mēģenes un uzgaļu, uzglabāšana un sagatavošana. Tādi glabāšanas reaģenti un palīgmateriāli, ko izmanto paraugu sagatavošanai, ir tieši jātransportē uz reaģenta glabāšanas un sagatavošanas vietu, un tos nevar iziet cauri pastiprināšanas noteikšanas zonai. Šajā jomā nevajadzētu uzglabāt pozitīvos kontroles materiālus un kvalitātes kontroles materiālus komplektā, bet tie jāuzglabā šajā jomā. Parauga apstrādes zona.
Parauga sagatavošanas laukuma funkcija ir nukleīnskābes (RNS, DNS) ekstrakcija, uzglabāšana un pievienošana amplifikācijas reakcijas caurulei. Attiecībā uz darbībām, kas saistītas ar klīniskiem paraugiem, jāievēro prasības attiecībā uz aizsardzības līdzekļiem, individuālo aizsardzību un ekspluatācijas specifikācijām bioloģiskās drošības sekundārajās laboratorijās. Tā kā paraugu sajaukšanas un nukleīnskābes attīrīšanas laikā var rasties piesārņojums ar aerosoliem, šajā jomā var noteikt pozitīvā spiediena apstākļus, lai izvairītos no aerosola piesārņojuma no kaimiņu zonām. Lai novērstu paraugu savstarpēju inficēšanos, pēc testējamās nukleīnskābes pievienošanas jāaptver reakcijas caurule, kurā ir reakcijas maisījums. Attiecībā uz potenciāli infekcioziem materiāliem vāks jāatver bioloģiskās drošības skapī, un ir jābūt skaidrām procedūrām paraugu apstrādei un inaktivācijai.
Amplifikācijas zonas funkcija ir: DNS sintēze, DNS pastiprināšana un noteikšana. Lai izvairītos no aerosolu radītā piesārņojuma, staigāšana šajā teritorijā ir jāsamazina līdz minimumam. Jāatzīmē, ka šajā jomā nedrīkst atvērt visas pārbaudītās reakcijas caurules.
Uzlabotās produktu analīzes laukuma funkcija ir: turpmāka analīze un pastiprinātu fragmentu noteikšana, piemēram, hibridizācija, fermentu hidrolīzes elektroforēze, augstas veiktspējas šķidruma analīzes denaturēšana, secība utt. Nukleīnskābes amplifikācijas produktiem ir dažādas analīzes metodes, piemēram, zondes hibridizācijas metodes uz membrānām vai uz mikroplatēm vai mikroshēmām (radionuklīdu marķēšana vai radioaktīvu nuklīdu marķēšana), tieša vai sagremota agarozes gela elektroforēze, poliakrilamīda gela elektroforēze, dienvidu pārnese, nukleīnskābju secības noteikšanas metodes, masveida spektrometrija utt.
Amplifikācijas produktu analīzes laukums ir galvenais amplifikācijas produktu piesārņojuma avots PCR laboratorijā, tāpēc ir jārūpējas, lai šajā jomā nesastātu pastiprinātāju produktu cauri izstrādājumiem un darba apģērbam. Izmantojot PCR-ELISA metodi pastiprinātu produktu noteikšanai, plākšņu mazgāšanai jāizmanto plākšņu mazgātājs, un atkritumu šķidrums jāsavāc 1 mol/l HCl, un to nevar izliet laboratorijā, bet tas jāiznīcina prom no PCR laboratorijas. Piliens. Izlietotais gals arī jāiemērc 1 mol/l HCl un pēc tam jāievieto atkritumu maisā iznīcināšanai saskaņā ar procedūrām, piemēram, sadedzināšanu. Tā kā šajā apgabalā var izmantot noteiktas ģenētiskas mutācijas un toksiskas vielas, piemēram, etīdija bromīdu, akrilamīdu, formaldehīdu vai radionuklīdus u. c., jāpievērš uzmanība eksperimentētāju drošības aizsardzībai.